Порядок сдачи иммунохимического анализа — ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России

Означает ли отсутствие антител, что человек заболеет, несмотря на то, что был вакцинирован?

Ни одна вакцина не дает стопроцентной защиты от болезни из-за частых мутаций вируса. Вакцинация, однако, увеличивает шансы на то, что при контакте с SARS-CoV-2 заболевание не будет иметь тяжелого течения. Даже если после вакцинации уровень антител не имеет достаточно высокого уровня, иммунитет Т-лимфоцитов все равно сохраняется. 

Человеческий организм имеет много способов защитить себя, и ученые все еще их изучают, чтобы иметь возможность укреплять иммунитет более эффективно.

Отсутствие антител к sars-cov-2 после вакцинации от covid-19 – что делать?

У людей с иммунными нарушениями синтез антител может не происходить даже после вакцинации. Исследования показывают, однако, что клеточный иммунитет, вероятно, будет развиваться. Пока нет рекомендаций давать таким людям бустерную дозу вакцин.

Наличие антител к sars-cov-2 – что делать?

Положительный результат теста на антитела к Sars-CoV-2 всегда следует рассматривать в контексте эпидемиологической ситуации.

Наличие антител IgG у привитого человека свидетельствует о правильной реакции организма – выработке гуморального иммунитета.

Наличие антител у человека, который не был вакцинирован, следует интерпретировать в зависимости от класса выявленных иммуноглобулинов:

• Антитела IgM у такого человека всегда должны быть подтверждены ПЦР-тестом, поскольку они могут указывать на продолжающуюся бессимптомную инфекцию. 
• Наличие антител IgG, с другой стороны, не указывает на заболевание! Они появляются после контакта с вирусом, но и сохраняются еще долго после его исчезновения из организма. 
• При отсутствии антител IgM только IgG может означать, что у человека была бессимптомная инфекция, и эта ситуация не требует дальнейшего тестирования.

Быстрый способ диагностики covid-19

Экспресс-тест на выявление антигена SARS-CoV-2 — быстрый способ диагностики COVID-19 на ранних стадиях заболевания методом иммунохроматографического анализа.

Иммунохроматографический анализ — это метод, основанный на принципе тонкослойной хроматографии и включающий реакцию между антигеноми и соответствующими ему антителом в биологических материалах.

• Антиген — это вещество, которое определяется организмом человека как чужеродное и которое может запускать иммунную (защитную) реакцию.
• Антитела — это белки, образующиеся клетками организма человека в ответ на внедрение в него антигена.

Одним из самых важным свойством антител является их способность избирательно связываться с антигеном. Антитела связываются только с определенными антигенами. На этой уникальной особенности антител и основаны все иммунологические методы анализа, в том числе и ИХА.

В чем разница между тестами на антитела и тестами на sars-cov-2?

В диагностике вируса SARS-CoV-2 и болезни COVID-19 существует два вида тестов. В зависимости от того, что мы хотим – обнаружить или исключить присутствие вируса в организме или проверить уровень иммунитета – могут быть выполнены генетический, антигенный тест или определение уровня иммунных антител.

Важно!

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

Иммунологическое исследование крови в «семейном докторе»

Для исследования берётся кровь из локтевой вены. Сдать кровь на иммунологический анализ можно в любой из поликлиник «Семейного доктора».

Интерпретация результатов производится врачом-иммунологом, который учитывает данные осмотра, жалобы пациента и результаты других исследований. Наибольшее внимание уделяется значительным отклонениям от нормы (более 20%), меньшие отклонения могут быть вызваны случайными факторами – диетой, стрессами, физическими нагрузками, а также индивидуальными особенностями организма.

Как проходит диагностика

• Для теста берется мазок из носоглотки (через ноздрю).
• Готовность результата — в течение 30 минут.

Когда назначается иммунологический анализ крови?

Иммунологическое исследование проводится:

Когда нужно сдать тест на антиген к sars-cov-2

Тест позволяет получить сразу же на месте качественную оценку на предмет инфицирования SARS-CoV-2. Поэтому ИФА тестирование уместно, если вы хотите исключить возможность заражения коронавирусной инфекцией и вам необходимо получить результат максимально быстро. Например, у вас проявились симптомы ОРВИ и вы хотите знать, что это точно не COVID-19.

Кто должен тестировать на антитела к sars-cov-2?

В принципе, противопоказаний для проведения тестов на антитела к SARS-CoV-2 нет. Но когда их следует делать?

Метод ифа может применяться для диагностики:

1. Вирусных заболеваний:

• ВИЧ-инфекции;
• вирусных гепатитов;
• цитомегаловирусной инфекции;
• вируса Эпштейн-Барр;
• герпетической инфекции;
• коронавирусной болезни.

2. Для диагностики инфекций, передающихся половым путем:

• сифилиса;
• хламидиоза;
• трихомониаза;
• гонореи;
• уреаплазмоза.

3. Уровня гормонов в эндокринологии.
4. Аутоантител и маркеров онкологических заболеваний в онкологии.
5. Общего IgE и специфических IgE антител в аллергологии.
6. Лекарственных препаратов, наркотиков в биологических образцах.
7. Белков сыворотки крови (ферритина, фибронектина и др.).

Недостаток антител и клеточного иммунитета

Иммунные антитела не единственная линия защиты организма от инфекции. Научные исследования показывают, что практически у всех выздоровевших и привитых людей достаточно быстро вырабатывается иммунитет клеточного типа. Что это значит?

Клеточный иммунитет основан на функции Т-лимфоцитов, активизирующихся после контакта с вирусом и выделяющих интерферон – вещество с вирулицидной активностью. У 100% людей, у которых был COVID-19, были обнаружены CD8 цитотоксические Т-клетки, а у 70% CD4 хелперные Т-клетки.

Необходимые документы для проведения исследования

1. Паспорт (копия паспорта) пациента.

2. Направление от врача.

Анализы на возмездной (коммерческой) основе принимаются только с направлением, содержащим следующие сведения:

Общий тест на антитела против sars-cov-2 (количественно)

В диагностических лабораториях тест на общие антитела против SARS-CoV-2 (количественно) проводится методом хемилюминесценции. Для этого исследования у пациента берется венозная кровь. Тест позволяет определить уровень общих антител, выраженный в международных единицах БАУ/мл. Положительный результат, выше 0,8 BAU/мл, свидетельствует о контакте с вирусом SARS-CoV-2.

Как и кассетный тест, исследование общих антител количественно не позволяет различать классы иммуноглобулинов. В некоторых ситуациях, однако, это лучшее решение, чем определение отдельных классов антител, потому что этот анализ имеет большую специфичность.

Это означает, что если вы тестируете на общие антитела, существует меньший риск перекрестных реакций, которые могут дать ложноположительный результат. Такое происходит, например, в случае людей с аутоиммунными заболеваниями или в случаях других активных вирусных инфекций.

Отличие иха от пцр-теста

Суть ПЦР — в выявлении этиологии инфекции. Это высокочувствительный метод, который позволяет поставить точный диагноз даже на ранней стадии течения заболевания, когда его симптомы еще не проявились

Тест ИХА нужен для того, чтобы сократить время между постановкой диагноза пациенту и назначением ему терапии

Отсутствие антител к sars-cov-2 после covid-19 – возможно ли это?

У определенной части населения (10%) после контакта с возбудителем синтез антител вообще отсутствует. Другая группа, хуже реагирующая на вирус, — это люди, у кого антитела вырабатываются в очень небольших количествах, и они быстро исчезают. Они могут не обнаруживаться в серологических тестах. 

Это нарушения иммунных механизмов, но это не значит, что иммунитет не вырабатывается. У таких людей развивается клеточный иммунитет с участием Т-лимфоцитов, который также уже можно изучать с помощью лабораторных анализов.

Подготовка к иммунологическому анализу крови

Для того чтобы результаты анализа были точными, сдавать кровь следует натощак. Лучше всего это сделать утром. Оптимально пациент должен не есть и не пить ничего, кроме воды в течение 12 часов перед сдачей анализа.

Накануне анализа не следует принимать алкоголь. В течение часа перед сдачей анализа желательно не курить.

Непосредственно перед сдачей анализа желательно присесть и находиться в покое 10-15 минут, чтобы исключить влияние физических и эмоциональных нагрузок на результаты исследований.

Подготовка к процедуре

Взятие пробы для лабораторного исследования методом ИФА должно проводиться:

• желательно с 7 до 9 часов утра;
• натощак, т.е. через 8-12 часов после последнего приема пищи;
• после воздержания от алкоголя не менее 24 часов;
• до проведения диагностических и лечебных процедур;
• в ряде случаев следует учитывать фазу менструального цикла, фармакодинамику лекарственных препаратов, циркадные ритмы.

Пациент должен находиться в спокойном состоянии не менее 15 минут: сидя или лежа. Наложение жгута (манжеты) не должно превышать 1 мин.

Подготовка к анализу

1. В течение 6 часов до сдачи анализа не орошать ротовую полость лекарствами, не рассасывать таблетки.
2. За 3 часа до процедуры не есть, не пить, не курить, не чистить зубы и не полоскать рот.

Показания к проведению иммунологического обследования:

Острые и хронические бактериальные, вирусные и паразитарные инфекции (болезнь Боткина, сепсис, пневмония, лейшманиоз, туберкулез, лепра и др.), подозрение на СПИД.

Аутоиммунные заболевания (ревматическая болезнь, ревматоидный артрит, системная красная волчанка и др.).

Аллергические заболевания (бронхиальная астма, поллиноз и др.).

Злокачественные заболевания (лейкозы, лимфогрануломатоз и др.).

Кожно-венерические заболевания (контактный дерматит, пузырчатка, микоз, сифилис и др.).

Патология беременности.

Контроль цитостатической, иммунодепрессивной и иммуностимулирующей терапии.

Обследование пациентов до и после трансплантации.

Первичные иммунодефицитные состояния и др.

Постановка иммунологического диагноза складывается из следующих этапов:

1. Сбор иммунологического анамнеза.
2. Выявление клинических проявлений иммунопатологии.
3. Иммунологические методы исследования.

В лабораторных исследованиях наибольшее распространение получил
твердофазный иммуноферментный анализ

В иммуноферментном анализе применяют ферменты, которые могут связывать антитела или антигены, меняют окраску специального хромогенного субстрата при взаимодействии с ним и могут быть зарегистрированы физико-химическим методом (методом спектрофотометрии, флуориметрическим, люминисцентным и др.).

На настоящий момент имеются усилительные системы, позволяющие регистрировать наличие всего нескольких сотен молекул ферментов в 1 мл раствора.

Фермент
– это сложное органическое вещество, вырабатываемое живой клеткой, способствующее различным химическим реакциям, происходящим в организме.

Хромогенный субстрат – это вещество белковой природы, приобретающее определенную окраску после расщепления специфическим протеолитическим ферментом.

Фотометрический анализ — метод качественного и количественного анализа, основанный на избирательном поглощении инфракрасного, видимого или ультрафиолетового излучения молекулами определяемого компонента или его соединения с соответствующим реагентом.

При проведении иммуноферментного анализа в качестве твердой фазы используется поверхность лунок полистиролового планшета, на которую адсорбированы входящие в состав тест-системы известные антитела (против определяемого антигена).

В лунку вносят исследуемую сыворотку крови. При наличии искомого антигена он соединяется с антителом, и образуются комплексы. Лунки промывают и удаляют не связавшиеся компоненты. В лунки вносят антитела к искомому антигену, меченые ферментом. Меченые антитела присоединяются к предыдущему комплексу и также остаются на стенках.

Затем в лунки добавляют специфичный для фермента субстрат (перекись водорода) и хромоген (ортофенилендиамин). Если в исследуемой жидкости был антиген, фермент взаимодействует с перекисью водорода и разлагает его. Выделившийся при этом кислород окрашивает хромоген в желтый цвет. По интенсивности окрашивания, возникающего в результате реакции фермента и субстрата, можно судить о количестве антигенов.

По аналогичной схеме работают тест-системы для определения антител, но в качестве иммуносорбента в них используются антиген, а раствор, который добавляют, содержит раствор антигенов, меченых ферментом.

В клинической диагностике с помощью фиксированных на твердой фазе антител (антигенов), определяют присутствие антигенов микроорганизмов, антител к ДНК, иммунных комплексов, антигенов раковых клеток, антител к различным видам бактерий, вирусов, простейших.

Показатели иммунологического анализа крови

Иммунологический анализ включает в себя комплекс показателей, отражающих состав и функциональную активность основных клеток иммунной защиты в разбивке по видам клеток и продукты их деятельности (иммуноглобулины). Развернутый анализ иммунной системы является достаточно сложным, требующим много времени, поэтому в зависимости от цели исследования иммунологический анализ может быть ограничен показателями, представляющими конкретную функцию иммунитета или затрагиваемые конкретной патологией.

Чаще всего исследуются:

• субпопуляции лимфоцитов – белых кровяных телец, различные виды которых распознают чужеродные структуры (антигены), вырабатывают антитела, направленные против чужеродных агентов, регулируют интенсивность иммунных процессов, распознают и уничтожают изменённые клетки организма (например, раковые клетки);
• иммуноглобулины – антитела, функцией которых является нейтрализация инфекционных возбудителей и токсинов. Прежде всего, исследуются иммуноглобулины классов A, M, G
  • Иммуноглобулины A (IgA) обеспечивают местный иммунитет слизистых оболочек. Повышенный уровень IgA отмечается при заболеваниях кожи, органов пищеварения и дыхания. Также это характерно при интоксикациях, алкоголизме, патологии печени и почек.
  • Иммуноглобулины M (IgM) активно вырабатываются при первичной защитной реакции организма, поэтому их повышенное количество наблюдаются в начале любого заболевания. Повышенное значение IgM также наблюдается при заболеваниях печени (прежде всего гепатите или циррозе печени).
  • Иммуноглобулины G (IgG) — самый массовый класс иммуноглобулинов. Они являются основной защитой, вырабатываемой в ответ на проникновение в организм инфекции. Их задача – убивать грибок, вирус, патогенные бактерии, обезвреживать вырабатываемые возбудителем инфекции токсины. Именно они отвечают за длительный иммунитет, защищающий нас от повторного поражения инфекцией.
  • Иммуноглобулины Е и D, вырабатываются, в основном, в ответ на паразитарную инфекцию  (поражение глистами) или в случае атопической аллергии.

Преимущества иммуноферментного анализа по сравнению с другими методами определения антигенов и антител:

• высокая чувствительность (ИФА может обнаруживать одиночные молекулы анализируемого вещества);
• возможность использования минимальных объемов исследуемого материала;
• стабильность всех ингредиентов, необходимых для проведения ИФА при хранении;
• простота проведения реакции;
• возможность автоматизации всех этапов реакции;
• относительно низкая стоимость диагностических наборов.

Иммуноферментный анализ может давать ложноположительный результат:

• при наличии ревматоидного фактора в крови, который является антителом против собственных IgG;
• при различных системных заболеваниях;
• при нарушениях обменных процессов в организме;
• при приеме некоторых лекарственных препаратов;
• у новорожденных детей.

Расписание приема анализов и выдачи результатов

Прием анализов и посылок:

• пн—чт, с 8:30 до 15:00;
• пт и предпраздничные дни, с 8:30 до 14:00.

Выдача результатов:

• пн—чт, с 8:30 до 16:45;
• пт и предпраздничные дни, с 8:30 до 15:30.

Готовность анализа — 10 рабочих дней.

Тел. единой справочной службы: 7 (800) 775-05-82, 7 (495) 612-45-51.

Результаты анализа

Анализ на антиген — качественный. Это означает, что заключение по его результатам может быть двух видов:

• результат отрицательный — инфекции не выявлено;
• результат положительный — инфекция обнаружена.

В случае положительного результата рекомендуется подтверждение диагноза другими методами (прежде всего, ПЦР).

Вы также можете пройти диагностику на антитела к SARS-CoV-2, это позволит уточнить стадию заболевания, а также подтвердить наличие сформированного иммунитета к COVID-19.

Тест на антитела класса igg или igm

Чтобы определить фазу инфекции или проверить поствакцинальный иммунитет, проводятся анализы крови на выявление антител в классе IgG или IgM. В чем разница между антителами IgG и IgM?

• Антитела IgM появляются на ранней стадии инфекции, всего через несколько дней после появления симптомов, и быстро исчезают. Их наличие в крови свидетельствует об активной фазе инфекции. Определение антител IgM может быть дополнением к молекулярной диагностике на ранней стадии инфекции, в том случае, когда генетический тест дает отрицательный результат, а симптомы и эпидемиологический анамнез указывают на вероятность заражения.
• Антитела IgG появляются позже – примерно через 10 дней после появления симптомов – и сохраняются в течение длительного времени в крови. Их наличие в крови свидетельствует о прошлом контакте с вирусом (как свежим, так и старым) и знаменует собой заключительную фазу заражения и приобретения иммунитета. Именно антитела IgG являются мерой иммунитета после вакцинации.

Тесты на антитела IgG, направленные против белка S вируса Sars-CoV-2 (spike-белка), позволяют определить прошлый контакт с вирусом и вырабатываемый иммунитет, но не дифференцируют, исходит ли иммунитет от вакцинации или от болезни COVID-19.

Тем не менее ученые все еще совершенствуют существующие продукты для лабораторной диагностики. В настоящее время проводятся тесты на антитела IgG, направленные против N-белка вируса (нуклеокапидного белка). Эти антитела вырабатываются только после болезни и контакта с целой вирусной частицей, потому что в вакцинах против COVID-19 нет N-белка.

Тест общих антител к sars-cov-2 (качественно)

Тест на общие антитела может быть выполнен иммунохроматографическим методом (кассетный тест) или методом хемилюминесценции.

Иммунохроматографический тест визуально выглядит как тест на беременность – в специальной кассете находится папиросная бумага с носителем и антигеном и красителем. Если в тестируемой капле крови есть антитела, они связываются с антигеном, и появляется эффект реакции в виде цветной полоски. Иммунохроматографический тест очень прост в выполнении, а результат получается через 15 минут.

Качественные тесты лучше всего подходят для скрининга, проверяющего, был ли пациент в контакте с вирусом. Однако они не дифференцируют отдельные классы антител, поэтому не позволяют определить, является ли положительный результат результатом свежей инфекции или предыдущей инфекции.

Тесты на выявление коронавируса

Чтобы напрямую подтвердить наличие вируса в организме человека, используется тест на коронавирус ПЦР или тест на антиген. Для тестов, выявляющих наличие коронавируса, у пациента берут мазок, потому что вирус SARS-CoV-2 живет в дыхательных путях.

• ПЦР (генетический) тест на коронавирус. Это самый верный и рекомендованный ВОЗ (Всемирной организацией здравоохранения) анализ, признанный «золотым стандартом» диагностики COVID-19. Этот тест позволяет обнаружить генетический материал (РНК) вируса, присутствующего в дыхательных путях. Тест на коронавирус ОТ-ПЦР очень чувствителен, а значит, позволяет обнаружить наличие вируса еще до появления симптомов заболевания.
• Тест на антиген коронавируса SARS-CoV-2. Это более специфический инструмент, он может подтвердить, вызваны ли уже присутствующие симптомы наличием вируса SARS-CoV-2 или нужно искать другой патоген. Этот анализ отличается от ПЦР-теста тем, что обнаруживает не генетический материал вируса, а его белковые компоненты.

Тесты на обнаружение антител

После контакта с вирусом организм человека начинает вырабатывать иммунные антитела – это ответ иммунной системы на патогенный агент. Они сохраняются в крови довольно долго и легко обнаруживаются с помощью лабораторных анализов. Такие тесты относительно дешевы и широко доступны.

Серологическое исследование антител к SARS-CoV-2 проводится из образца венозной крови.

Типы тестов для выявления антител к sars-cov-2?

Тесты на антитела можно разделить на качественные и количественные. 

• Качественные тесты. Обычно указывают на наличие или отсутствие антител в крови, без дифференциации между классами. Результат дается как отрицательный или положительный. 
• Количественные тесты. Дают точный уровень антител – общий или класс-специфический – выраженный в числовых значениях в международной единице BAU / ml.